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光スイッチ試薬_PA-Cre with Magnet-System®

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生命科学分野において、遺伝子の機能解析や病態モデルの作製手段として、時間・空間分解能が高く、薬剤投与では難しい精密なコントロールを実現可能な光操作技術が求められています。本製品は、Creリコンビナーゼに、光スイッチタンパク質Magnet System®を組み合わせた、光誘導型のCreリコンビナーゼ(Photoactivatable Cre; PA-Cre)です。この製品を用いることで、遺伝子の働きを、光刺激で時間・空間特異的にコントロールすることが可能になります。

株式会社ミーバイオ

 

 

株式会社ミーバイオは、東京大学 佐藤守俊教授の「光スイッチタンパク質」を活用し、本技術を用いて研究用試薬・コンディショナルノックアウトマウスの製品化、および共同研究を実施しています。生命科学分野における研究者の皆様の「これまでできなかった」を克服し、サイエンスの発展に貢献します。

PA-Cre with Magnet-System®の作用機構

PA-Cre with Magnet System®は、Creリコンビナーゼを二分割してDNA組換え活性を失わせた断片(split-Cre ; CreN59とCreC60)に光スイッチタンパク質Magnet System®(nMagとpMag)を連結しています。PA-Creは、暗所ではloxP(塩基配列)に対するDNA組換え活性を示しません(Inactive P A-Cre)。青色光(470±20nm)を照射すると、PA-Creに導入したMagnet System®(nMagとpMag)の結合により、Creリコンビナーゼの分割体(CreN59とCreC60)の相補化(complementation)が起こり、PA-Creは速やかに活性を回復します(Active PA-Cre)。この作用機構により、2つのloxPで挟まれたDNA配列の組換え反応を、青色光を照射したタイミングで、青色光を照射した細胞でのみ起こし、遺伝子の働きを、時間・空間特異的にコントロールすることが可能になります。

参考文献︓”A photoactivatable Cre-loxP recombination system for optogenetic genome engineering”
Nature Chemical Biology, 12, 1059-1064 (2016). DOI: https://doi.org/10.1038/nchembio.2205

本製品の活用例

●任意の遺伝子の発現を時空間的にON/OFF制御

 

●アプリケーションデータ_光スイッチ・コンディショナルノックアウトマウス

PA-Creをノックインしたマウスを作製することで、超時空間特異的にマウスの任意の遺伝子の破壊を制御することができます。以下の実験では、青色光照射部位でのみCre-loxP反応が起こり、部分特異的にレポーター遺伝子が光るのが確認できました。

また、外部照射により青色光は頭蓋骨を通過し、脳の中枢神経でも発現することが確認できました。

参考文献︓”Photoactivatable Cre knock-in mice for spatiotemporal control of genetic engineering in vivo” Laboratory Investigation. 2020 DOI: https://doi.org/10.1038/s41374-020-00482-5

製品情報

●本製品は「PA-Cre with Magnet System®」のクローニングに適したプラスミドベクター(pUC57)です。細胞などに発現させる場合は、発現ベクターへの導入が必要となります。
●本製品は株式会社ミーバイオによる事前の承認なしに、第三者への譲渡、再販、再販のための修正、商用製品の製造または第三者へのサービスに提供することはできません。詳しくは、お問い合わせください。
●本製品は「試験研究用」です。ヒトや動物を対象にした医療や臨床診断の目的では使用しないでください。

製品名 pPA-Cre with Magnet System®
濃度 1.0 μg/μL
容量 10 μL
溶媒 10 mM Tris-HCl, pH8.0, 1 mM EDTA
保管温度 -20 ℃

製品一覧

製品番号 製品名 保存温度 包装 価格
49328-01 pPA-Cre with Magnet System
pPA-Cre with Magnet System
冷凍 10μL

・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、製品番号をクリックいただきご確認いただけます。
・試薬のご購入とご使用に際して

パンフレット

PA-Cre with Magnet-System®

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