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シカジーニアス®毒素遺伝子検出キット(C. difficile用)

Clostridium difficile (Clostridioides difficile)は、抗菌薬関連下痢症・腸炎の主要な原因菌であり、医療関連感染の点から重要です。本菌が産生するtoxin Aおよびtoxin Bは、その病原性に大きな役割を果たしています。加えて、PCR-ribotype 027(BI/NAP1/027)株や、PCR-ribotype 078株などのbinary toxin産生株は欧米では高病原性株として知られ、binary toxinの臨床的意義が注目されています。
本キットは、国立感染症研究所との共同研究の成果から開発された3種類のPCRを用いて、
①toxin B産生株の推定同定、②toxin A陽性toxin B陽性株かtoxin A陰性toxin B陽性株かの推定同定、③binary toxin産生株の推定同定をそれぞれ行うことができます。

s_CDtoxin_top.png

特長

●Toxin A、toxin B、binary toxin産生株の推定同定が行えます。
●標準的なサーマルサイクラーで使用可能です。

キット構成(30回)

 個別名称容量数量
試薬A AptaTaq DNA Master(5×Conc.) *1 500 μL 1 本
試薬B PCRサプリメント 1,300 μL 1 本
試薬C プライマーミックス 1 200 μL 1 本
試薬D プライマーミックス 2 300 μL 1 本
試薬E プライマーミックス 3 200 μL 1 本
試薬F 陽性コントロールDNA 1 *2 50 μL 1 本
試薬G 陽性コントロールDNA 2 *3 30 μL 1 本
試薬H 陽性コントロールDNA 3 *4 30 μL 1 本
試薬I 陰性コントロール(TE緩衝液) 100 μL 1 本
試薬J 6×ローディングバッファー 500 μL 1 本

*1 AptaTaq DNA Master(5×Conc.)は、Roche Diagnostics K.K.の商品です。
*2 Toxin A陽性toxin B陽性binary toxin陰性のC. difficileより抽出したDNA。
*3 Toxin A陰性toxin B陽性binary toxin陰性のC. difficileより抽出したDNA。
*4 Toxin A陽性toxin B陽性binary toxin陽性のC. difficileより抽出したDNA。

操作手順

C. difficileを分離
DNA抽出*を行い、テンプレートDNAを調製
PCR
アガロースゲル電気泳動
バンドパターンの読み取り
判定

*DNA抽出法に関しては、添付文書をご参照ください。

PCRのフロー

s_CDtoxin_flow2.png
(クリックで拡大)
こちらのフローチャートに沿って、各種遺伝子の同定を行ってください。

電気泳動例

s_CDtoxin_eidou1.png

M:100 bpラダー
P1:陽性コントロールDNA1 (試薬 F)
P2:陽性コントロールDNA2 (試薬 G)
P3:陽性コントロールDNA3 (試薬 H)
N:陰性コントロール(試薬 I)

操作上の注意点

●PCR-2で1,266 bpおよび714 bpのいずれのPCR産物も得られない場合でも、toxin Aを産生する菌株があります。この場合はtoxin Aの産生性は推定できません。
●PCR-1については、C. sordelliiのlethal toxin(LT)遺伝子がtoxin B遺伝子とほぼ同じサイズの増幅産物として検出され、区別できない可能性があります。また、PCR-3については、C. perfringens E型のiota toxin遺伝子がbinary toxin遺伝子とほぼ同じサイズの増幅産物として検出され、区別できない可能性があります。
●本製品は試験研究用として販売しております。ヒトや動物を対象とした医療や臨床診断の目的には使用できません。

製品一覧

製品番号 製品名 保存温度 規格 包装 価格
08178-96 シカジーニアスR DNA抽出試薬
Cica geneusR DNA extraction reagent
冷蔵 分子生物学用 1pack(120回分) ¥22,000
08115-96 シカジーニアスR毒素遺伝子検出キット(C. difficile用)
Cica geneusR Toxin Gene Detection KIT (for C. difficile)
冷凍 分子生物学用 1pack(30回分) ¥42,000

●本キットは、国立感染症研究所との共同研究の成果から開発されました。
●他メーカーの商品に関するライセンスについては、各メーカーにご確認ください。
●製品の仕様は、製品の改良のため変更する場合がございます。あらかじめご了承ください。

・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、製品番号をクリックいただきご確認いただけます。
・試薬のご購入とご使用に際して

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Cica geneusR staph coaglase detection set
冷凍 分子生物学用 1pack(50回分) ¥50,000
08180-96 シカジーニアスR 分子疫学解析POTキット(黄色ブドウ球菌用)
Cica geneusR staph POT kit
冷凍 分子生物学用 1pack(120回分) ¥83,000
08180-97 シカジーニアスR 分子疫学解析POTキット(黄色ブドウ球菌用)
Cica geneusR staph POT kit
冷凍 分子生物学用 1pack(30回分) ¥38,000

・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、製品番号をクリックいただきご確認いただけます。
・試薬のご購入とご使用に際して

試薬等
製品番号 製品名 保存温度 規格 包装 価格
01098-23 アガロース KANTO LE(低電気浸透度)
Agarose KANTO LE
電気泳動用 100g ¥20,000
14575-43 臭化エチジウム溶液
Ethidium bromide solution
冷蔵 電気泳動用 10mL ¥5,000
49899-45 クイックロード パープル 100bp DNAラダー
Quick-Load Purple 100bp DNA Ladder
冷蔵 125 gel lanes ¥12,000
46509-79 10×TAE 緩衝液
10×TAE Buffer
電気泳動用 1L ¥4,500

・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、製品番号をクリックいただきご確認いただけます。
・試薬のご購入とご使用に際して

パンフレット

シカジーニアス® 毒素遺伝子検出キット(C. difficile用) (2.0MB)

取扱説明書

毒性遺伝子検出キット(C.difficile用)(360KB)

関連詳細ページ

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シカジーニアス® 薬剤耐性菌・病原因子関連PCRキットシリーズ
シカジーニアス® DNA抽出試薬
シカジーニアス® 核酸精製キット
電気泳動槽
ゲル撮影装置・UVトランスイルミネーター
サーマルサイクラー ジーンアトラス



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