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シカジーニアス® ウイロイド遺伝子型検出キット(PSTVd/TCDVd)

ウイロイドは、200~400塩基程度の短い環状一本鎖RNAのみで構成され、植物に対して感染性を持つ
病原体です。その中でも、ジャガイモやせいもウイロイド(Potato spindle tuber viroid : PSTVd)とトマト
退緑萎縮ウイロイド(Tomato chlorotic dwarf viroid : TCDVd)は、主にナス科植物(ジャガイモ、トマト、
ペチュニア等)に感染し、ジャガイモではやせイモ症状、トマトでは黄化・葉巻症状等の激しい症状を引き
起こします。これらは欧米やアジアなど世界各地で発生しており、我が国の農作物に被害を及ぼす可能性
の高い病害虫として、植物防疫法が定める検疫有害動植物に指定されています。また、日本国内でも海外
から輸入された種苗を介したと考えられる感染が報告されています。ウイロイドの感染拡大を防止する
ためには、感染植物の早期発見と防除対策が重要です。本キットは、マルチプレックスRT-PCR法により
PSTVdとTCDVdの2種類のウイロイドを同時に、かつ区別して検出することができます。

特長

●同一チューブ内で逆転写反応、増幅反応が可能な簡便操作(1-step RT-PCR)
●必要に応じて2種類の検体調製方法から選択可能(ダイレクトティシュー法、RNA精製)
●PSTVdとTCDVdの両ウイロイドをそれぞれ判別可能

キット構成(30回)

 個別名称容量数量
試薬A AllStart RNA Enzyme Mix(20×)*1 30 μL 1 本
試薬B AllStart RNA Reaction Mix(2×)*1 300 μL 1 本
試薬C プライマーミックス 180 μL 1 本
試薬D ポジティブコントロール*2 50 μL 1 本
試薬E 精製水 90 μL 1 本
試薬F 6×ローディングバッファー 120 μL 1 本

*1 AllStart RNA Enzyme MixおよびAllStart RNA Reaction Mixは、Roche Diagnostics K.K.の商品です。
*2 ポジティブコントロールについては感染性ならびに病原性がないことを確認しています。

操作手順

検体からRNAを抽出 / 精製 *3
1-step RT-PCR(本キット)
アガロースゲル電気泳動(別途準備)
バンドの読み取り
判定

*3 RNAの調製法は、針(虫ピン等)でRNAを抽出する方法(ダイレクトティシュ―法)、
     精製RNAをテンプレートとする方法の2種類が選択可能です。

【① 針(虫ピン等)でRNAを抽出する方法(ダイレクトティシュ―法)】
1 : 検体の葉に針(直径0.3~0.5 mm)を5~10回程度刺して下さい。
2 : 針先をRT-PCR反応液に浸け、針で反応液を軽くかき混ぜた後、針を取り出してください。
 
【② 精製RNAをテンプレートとする方法】
1 : 検体の葉からシカジーニアス® RNA精製キット(植物用)等を用いて
      RNAを精製して下さい(オプションのDNaseⅠ処理を実施してください)。
2 : 100 ng/μLに調製した精製RNA溶液を、RT-PCR反応液に加えてください。

検出対象とその増幅サイズ

検出対象増幅サイズ(bp)
PSTVd 273
TCDVd
191

アプリケーションデータ

本キットを用いてPSTVdまたはTCDVdに感染した植物をダイレクトティシュー法で試験した。
 
【① トマト感染株】
 
※ 本アプリケーションデータは、国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構(農研機構) 
     野菜花き研究部門様よりご提供いただきました。
 
 
【② トマト、ダリア感染株】
 
※ 本アプリケーションデータは、秋田県立大学生物資源科学部 バイオテクノロジーセンター様よりご提供いただきました。

製品情報

製品番号製品名保存温度規格包装価格
08076-96 シカジーニアス® ウイロイド遺伝子検出キット(PSTVd/TCDVd) 冷凍 分子生物学用 1pack(30回分) ¥36,000

● 本キットは研究用として販売しております。ヒトや動物を対象にした医療や臨床診断の目的には使用しないで下さい。
● 本キットは、国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構(農研機構)から発明(特許第5278919号)についての
     実施権の許諾を受けて製造販売しております。他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、
     各メーカーにご確認下さい。
● 製品の仕様は、製品の改良のため変更する場合がございます。あらかじめご了承下さい。

・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、製品番号をクリックいただきご確認いただけます。
・試薬のご購入とご使用に際して

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・「法律」,「SDS」,「在庫」など詳細情報は、製品番号をクリックいただきご確認いただけます。
・試薬のご購入とご使用に際して

パンフレット

シカジーニアス® ウイロイド遺伝子検出キット(PSTVd/TCDVd)

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